仁捷生物：人IL1β、 IL8、 TNF-α ELISA試劑盒文獻期刊

內 科 2018 年12 月 第13 卷 第6 期  
早產兒血清、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關系分析 
【摘要】 目的 探討早產兒血清、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關系。方法 選取腦損傷早產兒46 例作為腦損傷 組，選取同期出生未合并腦損傷的早產兒46 例作為對照組。采集兩組早產兒出生后第1 天、第 3 天、第 7 天的血液及腦脊 液，檢測比較兩組早產兒血液及腦脊液的白介素1β( IL1β) 、白介素8( IL8) 、腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 水平。將腦損傷組 早產兒按病情的嚴重程度分為輕、中、重度組，比較分析三組早產兒血液及腦脊液的 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平。結果 腦損 傷組早產兒血清、腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平均顯著高于對照組( P ＜ 0． 05) ; 隨著出生時間( 病程) 的延長，腦損傷組早 產兒血清、腦脊液以上各炎癥因子水平升逐漸高，腦損傷對血清 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平的影響存在差異( P ＜0． 05) 。不同 病情嚴重程度的三組腦損傷早產兒血清及腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平比較，差異有統(tǒng)計學意義( P ＜0． 05) ，各炎癥因子 水平均隨出生時間的延長而升高，病情嚴重程度對炎癥因子水平的影響與時間具有交互作用( P ＜0． 05) 。結論 早產兒血 清、腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平與其腦損傷的嚴重程度及病程有關。

實驗原理：                                     

將目標抗體包被于微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

技術小提示：

1. 當混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫。

2. 為了避免交叉感染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3. 每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結果的準確性。

4. 混合后的顯色底物在上板前應為無色，請避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍色。

5. 終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內顏色由藍變黃；若孔內有綠色，則表明孔內液體未混勻；請充分混合。