看這兒，大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的使用方法和選購(gòu)常識(shí)介紹
實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒選購(gòu)知識(shí)：
01.特異性
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分、抗體對(duì)有關(guān)，若抗體對(duì)中之一為多抗，另一個(gè)有必要為單抗，主張運(yùn)用雙單抗。
02.活絡(luò)度
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的活絡(luò)度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選適宜的試劑盒，假如待檢目標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可挑選高敏的elisa試劑盒。
03.重復(fù)性
科學(xué)試驗(yàn)講究重復(fù)性，一般大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。
04.簡(jiǎn)便性
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒在確保高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，試驗(yàn)時(shí)刻越短，操作越便當(dāng)，越簡(jiǎn)單受到用戶歡迎!這也不妨作為挑選試劑盒的一個(gè)目標(biāo)。
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